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2023-04-1838347 次瀏覽
第四期 | 細胞工廠擴大化培養(yǎng)之進階串聯(lián)篇


細胞培養(yǎng)是一項耗費心思與精力的工作,

當小伙伴們養(yǎng)的細胞已經在細胞板或細胞瓶中茁壯成長之時,

就需要給他們換一個大戶型的家。


上期我們聊到耐思細胞工廠密閉系統(tǒng)的優(yōu)勢以及如何定制所需的密閉系統(tǒng),

初步解決了防污染的理論問題。


配件都有哪些?

如何利用小配件將細胞工廠玩出花?

如何從單排獨棟進階成高階聯(lián)排別墅?

進階串聯(lián)篇,即將加載......

PART 1

細胞工廠配件





耐思神器—生物工藝配件



液體傳輸管



轉換接頭


其他配件



PART 2

聯(lián)排別墅指南



由于細胞工廠的培養(yǎng)特性,工藝放大過程中可以采用增加細胞工廠的數(shù)量的方式。


但當細胞工廠數(shù)量增多時,就會面臨多次開蓋操作造成的污染風險。


為了解決這個問題,我們就要用到一個很簡單的方式:細胞工廠連連看。


將細胞工廠從單個的單位組成一組,并且利用配件將多個細胞工廠組合成一個半封閉/封閉的系統(tǒng)。


3個40層細胞工廠串聯(lián)操作指南

(一種方式的演示)




PART 3

聯(lián)排別墅使用教程

(以10層細胞工廠為例)



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ST

進液操作

1. 將細胞工廠串聯(lián),將儲液桶上的管路安裝至蠕動泵,確保管路松緊適中,并與串聯(lián)的細胞工廠管路連接。


2. 將管路上所有軟管夾打開,打開蠕動泵。培養(yǎng)基通過管路進入串聯(lián)的細胞工廠。操作過程中盡量避免產生氣泡。

注:因進液速度不一樣,我們可以通過關閉相應軟管夾來控制進液量。

3. 當進液量足夠后關閉蠕動泵,并關閉所有管路上軟管夾。


4. 將軟管從蠕動泵中取出,斷開管路接口。將細胞工廠側放,使液面平均分配到每層,進液管路側朝下,空氣濾器側朝上,避免液體進入到空氣濾器中。


5. 順時針旋轉90℃,使加液口朝上,靜置后液體平均分配到每一層。緩慢將細胞工廠放至水平位置,將管路整理好或換成透氣蓋(過濾器組件亦可),然后放入細胞培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)。

注:若管路末端熱封,在正常環(huán)境下進行管路對接或斷開即可,若管路末端為接頭,應在百級環(huán)境下進行管路連接或斷開。

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取液操作

1. 將細胞工廠串聯(lián)并側放(進出液管路側朝下,空氣濾器側朝上),將儲液桶上的管路安裝至蠕動泵,確保管路松緊適中,并與串聯(lián)的細胞工廠管路連接。


2. 打開所有軟管夾,將蠕動泵開啟,細胞培養(yǎng)液通過管路回收至儲液桶。


3. 收取一定量液體后將細胞工廠傾斜,便于取液。

注:取液時最好將細胞工廠放置支架上,若沒有支架,也可自行進行墊高,使細胞培養(yǎng)液更充分的流出。

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消化操作

1. 將管路與裝有消化液的儲液桶相連,打開蠕動泵,開始加入消化液。

注:因進液速度不一樣,我們可以通過關閉相應軟管夾來控制進液量。


2. 關閉蠕動泵并斷開接口,然后將細胞工廠側放,使消化液平均分配到每層,進液管路側朝下,空氣濾器側朝上,避免液體進入到空氣濾器中。


3. 順時針旋轉90℃,使加液口朝上,靜置后液體平均分配到每一層。


4. 緩慢將細胞工廠放至水平位置,將每個細胞工廠微微搖晃,使消化液覆蓋貼壁細胞,靜置消化。消化完成后將管路與收集容器相連,打開所有軟管夾后開啟蠕動泵,傾斜細胞工廠后開始液體轉移。

注:可以通過細胞工廠支架將底部抬高,防止液體殘留,也可自行進行墊高,使消化液更充分的流出。

 

5. 液體收集完成后關閉蠕動泵。由于生產工藝的區(qū)別,在使用細胞工廠進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)時可能會采用不同的串聯(lián)方式,不同的生物工藝配件。


由于生產工藝的區(qū)別,

在使用細胞工廠進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)時可能會采用不同的串聯(lián)方式,

不同的生物工藝配件。


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